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表2-1-1组成细胞的化合物的种类及含量:
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种 类 |
含量(质量分数/%) |
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有机化合物
(除CO、CO2、碳酸盐等以外的所有含碳化合物) |
蛋白质 |
占7~10 |
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脂质 |
占1~2 |
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糖类和核酸 |
占1~1.5 |
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无机化合物
(有机化合物以外的化合物) |
水 |
占85~90 |
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无机盐 |
占1~1.5 |
表2-1-2【实验】检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质:
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实验原理 |
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
1.还原糖的鉴定原理:还原糖(如葡萄糖、果糖)中的基团-CHO,与Cu(OH)2(斐林试剂)发生作用,可以生成砖红色的Cu2O沉淀,即:
-CHO+2Cu(OH)2→-COOH+Cu2O↓+2H2O(加热条件下)
2.脂肪的鉴定原理:脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。
3.蛋白质鉴定原理:蛋白质(实际上是指与双缩脲结构相似的肽键)与双缩脲试剂发生作用(在碱性溶液中与Cu2+反应),可以产生紫色的络合物。
4.淀粉遇碘变蓝色。 |
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目的要求 |
尝试用化学试剂检测生物组织中糖类、脂肪和蛋白质。 |
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材料用具 |
一、实验材料:
1.还原糖的鉴定:苹果或梨匀浆。
2.脂肪的鉴定:花生种子,花生种子匀浆。
3.蛋白质的鉴定:豆浆,鲜肝提取液。
4.淀粉的鉴定:马铃薯匀浆。
二、仪器:双面刀片,试管(最好用刻度试管),试管架,试管夹,大小烧杯,小量筒,滴管,酒精灯,三角架,石棉网,火柴,载玻片,盖玻片,毛笔,吸水纸,显微镜。
三、试剂:斐林试剂,苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)染液,双缩脲试剂,体积分数为50%的酒精溶液,碘液,蒸馏水。 |
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方
法
步
骤 |
步 骤 |
操 作 方 法 |
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还原糖的检测和观察 |
检测 |
加样液 |
向试管内注入2 mL待测组织样液。 |
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加鉴别试剂 |
向试管内注入1 mL斐林试剂。振荡试管,使溶液混合均匀,此时呈现蓝色。 |
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加热 |
将试管放进盛有50~65 ℃温水的大烧杯中,加热约2 min。 |
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观察现象 |
蓝色 → 棕色 → 砖红色沉淀 |
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脂肪的检测和观察 |
方法一 |
向待测的组织样液中滴加3滴苏丹Ⅲ染液,观察颜色变化。 |
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方法二 |
取材 |
取浸泡过的花生种子,去掉种皮。 |
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切片 |
用刀片将子叶的横断面上平行切下若干薄片,放入盛有清水的培养皿中待用。 |
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制装片 |
1.从培养皿中选取最薄的切片,用毛笔蘸取放在载玻片中央;
2.在花生子叶片上滴2~3滴苏丹Ⅲ染液,染色3 min,(如用苏丹Ⅳ染液,染色1 min);
3.用吸水纸吸去染液,滴1~2滴50%的酒精,洗去浮色;
4.用吸水纸吸去子叶周围的酒精,滴一滴蒸馏水,盖上盖玻片,制成临时装片。 |
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观察 |
在低倍镜下找到花生子叶的最薄处,移至视野中央,将影像调清楚,再转换高倍镜观察。 |
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现象 |
脂肪小颗粒苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染成红色)。 |
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蛋白质的检测和观察 |
鉴定 |
加样液 |
向试管内注入待测组织样液2 mL。 |
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加鉴别
试剂 |
向试管内注入双缩脲试剂A液1 mL,摇匀。再加入4滴双缩脲试剂B液,摇匀。 |
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观察现象 |
蓝色→紫色 |
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淀粉的检测和观察 |
鉴定 |
加样液 |
用试管取2mL待测组织样液 |
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加鉴别
试剂 |
向试管内滴加2滴碘液 |
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观察现象 |
溶液变蓝 | |